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生物信息学与 AI 制药工程
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《Visium低质量Spot识别与质控报告》
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Visium低质量Spot识别与质控报告
共计 30 章节
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01
空间转录组学概览
介绍空间转录组技术原理 · Spot概念 · 常见平台(10x Visium
空间转录组学概览
介绍空间转录组技…
02
低质量Spot的影响
分析低质量Spot对下游分析(聚类 · 差异表达 · 空间模式)的影响
Spot
低质量
03
质量控制总览
从原始数据到过滤后数据的完整QC流程…
质量控制总览
QC
04
数据格式与读取
掌握h5 · spaceranger输出格式 · 使用Scanpy/Seurat读取数…
数据格式
读取
05
UMI计数分布
理解UMI计数的分布特征 · 识别异常值
UMI
计数分布
06
基因检测数分布
分析每个Spot检测到的基因数量 · 设置合理阈值
基因检测数分布
Spot
07
线粒体基因比例
计算线粒体基因比例 · 识别低质量或死亡细胞
线粒体基因比例
计算线粒体基因比…
08
核糖体基因比例
核糖体基因比例过高或过低的生物学意义
核糖体基因比例
核糖体基因比例过…
09
血红蛋白基因比例
在组织样本中血红蛋白基因污染问题的处…
血红蛋白基因比例
组织样本
10
双细胞识别
采用DoubletFinder · Scrublet等方法检测双细胞
双细胞识别
DoubletFinde…
11
空液滴过滤
基于总计数和基因数的空液滴去除(如E…
空液滴过滤
基于总计数
12
基于细胞复杂度的过滤
使用log10(genes)/log…
基于细胞复杂度的…
log10
13
基于细胞周期分数的过滤
去除细胞周期相关的波动
基于细胞周期分数…
去除细胞周期相关…
14
基于背景信号的过滤
识别组织边缘或背景区域的Spot
基于背景信号的过…
Spot
15
质量控制可视化
绘制QC指标的小提琴图 · 散点图 · 阈值图
质量控制可视化
QC
16
自动阈值选择
基于分位数 · MAD · GMM等方法自动确定阈值
自动阈值选择
基于分位数
17
手动阈值调整
结合生物学知识手动优化过滤参数
手动阈值调整
结合生物学知识手…
18
多批次质量控制
整合多个样本时的QC一致性处理
多批次质量控制
QC
19
基于参考基因组的过滤
去除假基因或污染来源
基于参考基因组的…
去除假基因或污染…
20
基于空间位置的质量控制
利用组织形态学信息(如HE染色)辅助…
基于空间位置的质…
HE
21
过滤后数据归一化
SCTransform · LogNormalize等方法
过滤后数据归一化
SCTransform
22
质量控制报告生成
使用R Markdown或Jupyt…
质量控制报告生成
Markdown
23
交互式质量控制工具
使用Shiny · Plotly构建交互式QC界面
交互式质量控制工…
Shiny
24
质量控制标准流程脚本
编写可复用的QC pipeline脚…
质量控制标准流程…
QC
25
常见问题与踩坑
过滤过严或过松导致的典型错误
常见问题
踩坑
26
案例研究1
小鼠脑组织空间转录组数据QC实战
案例研究1
QC
27
案例研究2
肿瘤组织样本QC与异质性分析
案例研究2
QC
28
案例研究3
FFPE样本质量较低时的处理策略
案例研究3
FFPE
29
质量控制结果评估
通过下游聚类稳定性 · 基因表达分布评估QC效果
质量控制结果评估
通过下游聚类稳定…
30
总结与展望
低质量Spot剔除技术的未来发展 · 结合深度学习方法
Spot
低质量
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