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生物技术_生物工程与智能实验室
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009-重组蛋白表达与蛋白工程
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《难表达蛋白系统优化工程》
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本课程属于:009-重组蛋白表达与蛋白工程
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难表达蛋白系统优化工程
共计 30 章节
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01
难表达蛋白系统优化工程导论
目标=界定难表达蛋白的典型类型(膜蛋… · 毒性蛋白 · 聚集倾向蛋白
难表达蛋白系统优…
目标=界定难表达…
02
目标蛋白难表达性预判与风险分级
目标=基于序列与结构特征(疏水区 · 信号肽 · 跨膜区
目标蛋白难表达性…
风险分级
03
表达系统选择决策
目标=对比大肠杆菌 · 枯草芽孢杆菌 · 酵母
表达系统选择决策
目标=对比大肠杆…
04
难表达蛋白的基因序列优化
目标=围绕密码子适应 · 同义突变 · 稀有密码子替换
难表达蛋白的基因…
目标=围绕密码子…
05
表达载体元件工程
目标=启动子 · 核糖体结合位点 · 复制子
表达载体元件工程
目标=启动子
06
宿主细胞工程改造
目标=面向难表达蛋白的宿主改造策略 · 包括蛋白酶缺陷 · 还原酶/氧化酶通路调节
宿主细胞工程改造
目标=面向难表达…
07
共表达与融合伴侣策略
目标=系统梳理分子伴侣 · 折叠酶 · 二硫键异构酶
共表达
融合伴侣策略
08
包涵体形成与可溶表达调控
目标=分析包涵体形成的动力学与热力学… · 通过温度 · 诱导剂浓度
包涵体形成
可溶表达调控
09
膜蛋白表达与膜插入优化
目标=针对原核与真核膜蛋白 · 优化信号肽 · 跨膜区
膜蛋白表达
膜插入优化
10
毒性蛋白表达与宿主耐受工程
目标=识别毒性机制(膜损伤 · 核酸损伤 · 代谢干扰
毒性蛋白表达
宿主耐受工程
11
二硫键蛋白与氧化折叠优化
目标=针对多二硫键蛋白 · 优化宿主氧化还原环境(trxB/go… · Dsb系统
二硫键蛋白
氧化折叠优化
12
分泌表达与周质空间工程
目标=比较胞内 · 周质 · 胞外分泌路径
分泌表达
周质空间工程
13
无细胞系统与难表达蛋白合成
目标=利用大肠杆菌 · 小麦胚芽 · 兔网状红细胞
无细胞系统
难表达蛋白合成
14
酵母表达系统优化
目标=针对毕赤酵母 · 酿酒酵母 · 解脂耶氏酵母
酵母表达系统优化
目标=针对毕赤酵…
15
昆虫杆状病毒表达系统优化
目标=优化杆状病毒载体 · 启动子 · 感染复数
昆虫杆状病毒表达…
目标=优化杆状病…
16
哺乳动物细胞表达系统优化
目标=针对CHO · HEK293等宿主 · 优化载体
哺乳动物细胞表达…
CHO
17
难表达蛋白的翻译后修饰与质量控制
目标=分析糖基化 · 磷酸化 · 乙酰化
难表达蛋白的翻译…
质量控制
18
表达条件高通量筛选与实验设计
目标=运用微孔板 · 微流控 · 生物反应器微型化
表达条件高通量筛…
实验设计
19
难表达蛋白的检测与定量方法
目标=建立SDS-PAGE · Western blot · ELISA
难表达蛋白的检测
定量方法
20
蛋白折叠与聚集状态分析
目标=使用圆二色 · 荧光 · 动态光散射
蛋白折叠
聚集状态分析
21
难表达蛋白的增溶与复性工程
目标=针对包涵体与聚集蛋白 · 优化变性剂 · 增溶条件
难表达蛋白的增溶
复性工程
22
膜蛋白增溶、稳定与重构
目标=选择去垢剂 · 脂质 · 纳米盘
膜蛋白增溶
稳定
23
难表达蛋白的纯化策略设计
目标=结合标签亲和 · 离子交换 · 疏水
难表达蛋白的纯化…
目标=结合标签亲
24
表达系统放大与工艺转移
目标=从摇瓶到生物反应器 · 优化接种 · 补料
表达系统放大
工艺转移
25
难表达蛋白表达中的宿主-载体-工艺协同优化
目标=以实际靶点为例 · 整合基因 · 载体
难表达蛋白表达
宿主
26
难表达蛋白的稳定细胞株与基因整合优化
目标=通过定点整合 · 转座子 · 慢病毒
难表达蛋白的稳定…
基因整合优化
27
难表达蛋白的定向进化与筛选
目标=利用易错PCR · DNA shuffling · 随机突变
难表达蛋白的定向…
筛选
28
难表达蛋白系统工程中的AI与计算辅助
目标=应用序列-结构预测 · 聚集倾向预测 · mRNA结构预测
AI
难表达蛋白系统工…
29
典型难表达蛋白实战案例
目标=选取膜蛋白 · 毒性蛋白 · 多二硫键蛋白
典型难表达蛋白实…
目标=选取膜蛋白
30
难表达蛋白系统优化工程总结与项目实战
目标=整合全课程方法 · 完成一个难表达蛋白表达优化项目方案设… · 实验计划
难表达蛋白系统优…
项目实战
所属VIP或分类
同VIP:哺乳动物细胞蛋白表达工程
同VIP:大肠杆菌重组蛋白表达工程
同VIP:昆虫细胞蛋白表达工程