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生物技术_生物工程与智能实验室
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009-重组蛋白表达与蛋白工程
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《昆虫细胞蛋白表达工程》
VIP14
本课程属于:009-重组蛋白表达与蛋白工程
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昆虫细胞蛋白表达工程
共计 30 章节
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01
昆虫细胞蛋白表达工程导论
目标=杆状病毒表达系统的历史演进 · 核心优势 · 典型应用场景与整体技术路线图
昆虫细胞蛋白表达…
目标=杆状病毒表…
02
昆虫细胞宿主选择与维护
目标=Sf9 · Sf21 · High Five
昆虫细胞宿主选择
维护
03
杆状病毒基因组与表达载体设计
目标=AcMNPV与BmNPV基因组… · 多角体蛋白与p10启动子 · 转移载体元件与克隆策略
杆状病毒基因组
表达载体设计
04
重组杆状病毒构建方法
目标=同源重组 · Bac-to-Bac杆粒系统 · FlashBAC
重组杆状病毒构建…
目标=同源重组
05
杆状病毒扩增与滴度测定
目标=P0至P3病毒扩增流程 · TCID50与qPCR滴度测定 · 病毒储液制备与稳定性评估
杆状病毒扩增
滴度测定
06
昆虫细胞转染与蛋白表达启动
目标=脂质体转染 · 磷酸钙共沉淀 · 转染效率优化
昆虫细胞转染
蛋白表达启动
07
分泌型蛋白表达与信号肽工程
目标=天然信号肽与异源信号肽选择 · 分泌效率优化 · 内质网应激与分泌瓶颈分析
分泌型蛋白表达
信号肽工程
08
膜蛋白在昆虫细胞中的表达
目标=GPCR · 离子通道 · 转运蛋白的表达策略
膜蛋白
昆虫细胞
09
胞内可溶性蛋白表达与折叠优化
目标=伴侣蛋白共表达 · 二硫键形成 · 温度与渗透压调控
胞内可溶性蛋白表…
折叠优化
10
昆虫细胞中的翻译后修饰
目标=N-糖基化 · O-糖基化 · 磷酸化
昆虫细胞
翻译后修饰
11
糖工程昆虫细胞系改造
目标=N-糖基化通路基因敲除与敲入 · 哺乳动物化糖型改造 · 糖基化均一性控制
糖工程昆虫细胞系…
N
12
昆虫细胞表达系统与哺乳动物表达系统对比
目标=表达量 · 糖型 · 折叠
昆虫细胞表达系统
哺乳动物表达系统…
13
重组蛋白表达条件高通量筛选
目标=96深孔板与摇瓶平行培养 · DOE实验设计 · 温度
重组蛋白表达条件…
目标=96深孔板
14
昆虫细胞大规模培养与生物反应器
目标=批次 · 补料分批 · 灌流培养
昆虫细胞大规模培…
生物反应器
15
杆状病毒表达系统的放大与工艺转移
目标=种子扩增策略 · 感染时机 · 病毒衰减
杆状病毒表达系统…
工艺转移
16
重组蛋白的亲和标签设计与纯化
目标=His · GST · Strep
重组蛋白的亲
标签设计
17
昆虫细胞表达蛋白的精细纯化
目标=离子交换 · 疏水层析 · 凝胶过滤
昆虫细胞表达蛋白…
目标=离子交换
18
重组蛋白的质量分析与表征
目标=SDS-PAGE · Western blot · 质谱
重组蛋白的质量分…
表征
19
昆虫细胞表达病毒样颗粒与多聚体蛋白
目标=VLP组装 · 衣壳蛋白共表达 · 组装效率评估与疫苗候选物制备
昆虫细胞表达病毒…
多聚体蛋白
20
昆虫细胞表达膜蛋白复合物与结构生物学应用
目标=共表达策略 · 复合物组装 · 冷冻电镜与X射线晶体学样品制备
昆虫细胞表达膜蛋…
结构生物学应用
21
CRISPR/Cas9在昆虫细胞工程中的应用
目标=宿主细胞基因敲除 · 敲入 · 启动子替换与表达宿主定制化改造
CRISPR/Cas9
昆虫细胞工程
22
昆虫细胞表达系统的稳定细胞系构建
目标=转座子 · 慢病毒 · 定点整合
昆虫细胞表达系统…
目标=转座子
23
无血清悬浮培养与细胞代谢优化
目标=无血清驯化 · 代谢副产物控制 · 谷氨酰胺与葡萄糖流加策略
无血清悬浮培养
细胞代谢优化
24
昆虫细胞表达过程中的蛋白酶降解控制
目标=宿主蛋白酶鉴定 · 蛋白酶抑制剂添加 · 基因敲除与培养条件调控
昆虫细胞表达过程
蛋白酶降解控制
25
重组蛋白表达失败案例诊断与故障排除
目标=低表达 · 截短 · 聚集
重组蛋白表达失败…
故障排除
26
昆虫细胞表达工程中的成本控制与工艺经济性
目标=培养基成本 · 病毒制备成本 · 纯化成本与整体工艺优化
昆虫细胞表达工程
成本控制
27
昆虫细胞表达系统在疫苗与生物制药中的应用
目标=流感疫苗 · HPV疫苗 · 基因治疗载体与临床级生产要求
昆虫细胞表达系统
疫苗
28
昆虫细胞表达系统在诊断试剂与酶制剂中的应用
目标=抗原 · 抗体 · 报告酶
昆虫细胞表达系统
诊断试剂
29
昆虫细胞表达工程的数据管理与实验记录
目标=电子实验记录 · 质粒与病毒库管理 · 数据可追溯性与合规性
昆虫细胞表达工程…
实验记录
30
昆虫细胞蛋白表达工程综合实战
目标=从基因合成到纯化表征的完整项目… · 执行 · 记录与结果汇报
昆虫细胞蛋白表达…
目标=从基因合成…
所属VIP或分类
同VIP:哺乳动物细胞蛋白表达工程
同VIP:大肠杆菌重组蛋白表达工程
同VIP:膜蛋白表达与稳定化工程