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哺乳动物细胞蛋白表达工程

共计 30 章节
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01
哺乳动物细胞蛋白表达工程导论
目标=课程目标 · 核心技术对象 · 表达系统分类
哺乳动物细胞蛋白…目标=课程目标
02
表达宿主细胞选择
目标=CHO · HEK293 · NS0
表达宿主细胞选择CHO
03
表达载体元件设计
目标=启动子 · 增强子 · polyA
表达载体元件设计目标=启动子
04
目的基因优化
目标=密码子偏好性 · GC含量 · mRNA二级结构
目的基因优化目标=密码子偏好…
05
稳定转染与筛选策略
目标=脂质体 · 电转 · 病毒载体导入
稳定转染筛选策略
06
瞬时转染表达
目标=PEI · 磷酸钙等方法 · 细胞密度
瞬时转染表达PEI
07
基因扩增系统
目标=DHFR · GS等扩增标记原理 · 甲氨蝶呤/MSX加压策略与高表达克隆…
基因扩增系统DHFR
08
克隆筛选与高通量评估
目标=有限稀释 · 克隆成像 · 微型生物反应器与表达量快速检测
克隆筛选高通量评估
09
细胞培养基础与培养基设计
目标=基础培养基 · 血清替代 · 化学成分明确培养基与关键营养组分
细胞培养基础培养基设计
10
补料分批培养工艺
目标=葡萄糖 · 谷氨酰胺 · 氨基酸补料策略与代谢副产物控制
补料分批培养工艺目标=葡萄糖
11
灌流培养工艺
目标=细胞截留装置 · 灌流速率 · 稳态维持与高产率连续表达
灌流培养工艺目标=细胞截留装…
12
工艺参数控制
目标=温度 · pH · 溶氧
工艺参数控制目标=温度
13
蛋白分泌与胞内表达策略
目标=信号肽优化 · 分泌途径工程 · 胞内可溶表达与包涵体处理
蛋白分泌胞内表达策略
14
翻译后修饰工程
目标=糖基化 · 磷酸化 · 二硫键形成与宿主细胞糖工程改造
翻译后修饰工程目标=糖基化
15
表达产物降解控制
目标=宿主细胞蛋白酶 · 培养基蛋白酶抑制 · 培养条件与序列改造
表达产物降解控制目标=宿主细胞蛋…
16
重组蛋白纯化衔接
目标=亲和标签 · 离子交换 · 疏水层析与表达工艺的整合设计
重组蛋白纯化衔接目标=亲
17
表达量检测与定量
目标=ELISA · Western blot · HPLC
表达量检测定量
18
产品质量分析
目标=聚集体 · 片段 · 电荷变异
产品质量分析目标=聚集体
19
细胞株稳定性与遗传稳定性
目标=长期传代 · 基因拷贝数 · 表达漂移与主细胞库管理
细胞株稳定性遗传稳定性
20
无血清悬浮驯化
目标=从贴壁含血清到无血清悬浮培养的…
无血清悬浮驯化目标=从贴壁含血…
21
高通量工艺开发
目标=微型生物反应器 · DoE实验设计 · 响应面法与工艺参数优化
高通量工艺开发目标=微型生物反…
22
放大与缩小模型
目标=几何相似 · 功率输入 · 混合时间
放大缩小模型
23
生物反应器操作模式
目标=批次 · 补料分批 · 灌流与连续培养的工程实现与比较
生物反应器操作模…目标=批次
24
表达系统案例一
目标=CHO细胞表达单克隆抗体——载… · 克隆 · 工艺与质量分析
表达系统案例一CHO
25
表达系统案例二
目标=HEK293细胞表达病毒蛋白或…
表达系统案例二HEK293
26
表达系统案例三
目标=融合蛋白与双特异性抗体表达——… · 组装与纯化挑战
表达系统案例三目标=融合蛋白
27
表达系统案例四
目标=酶与细胞因子表达——活性维持 · 折叠与分泌优化
表达系统案例四目标=酶
28
工艺经济性与放大生产
目标=成本分析 · 培养基优化 · 产量提升与生产规模选择
工艺经济性放大生产
29
法规与质量控制
目标=GMP要求 · 细胞库检定 · 工艺验证与批放行标准
法规质量控制
30
前沿与未来方向
目标=基因编辑 · 合成生物学 · 连续制造
前沿未来方向