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《Seurat数据标准化实战指南》
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Seurat数据标准化实战指南
共计 30 章节
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01
Seurat入门
单细胞RNA-seq简介 · Seurat包概述 · 安装Seurat及依赖
Seurat
RNA-seq
02
数据准备
读取10X Genomics数据 · 创建Seurat对象 · 数据格式检查
数据准备
Genomics
03
质量控制
计算线粒体/核糖体比例 · 过滤低质量细胞 · 过滤双细胞
质量控制
计算线粒体
04
标准化基础
为何需要标准化 · 标准化与归一化的区别 · Seurat标准化流程概览
标准化基础
为何需要标准化
05
LogNormalize方法
原理讲解 · 使用NormalizeData函数 · 参数设置
LogNormalize
原理讲解
06
SCTransform方法
正则化负二项回归模型 · SCTransform函数 · 与LogNormalize对比
SCTransform
正则化负二项回归…
07
CLR与RC方法
中心化对数比(CLR)和相对计数(R… · 适用场景
CLR
RC
08
自定义标准化
手动编写标准化函数 · 修改Seurat内部标准化步骤
自定义标准化
手动编写标准化函…
09
归一化比例因子
设置scale.factor参数 · 影响分析 · 实际建议
归一化比例因子
scale.factor
10
变量基因选择
FindVariableFeatur… · 选择方法(vst/mean.var.…
变量基因选择
FindVariable…
11
主成分分析(PCA)
RunPCA函数 · 确定主成分数量 · ElbowPlot
PCA
主成分分析
12
批次效应校正
Harmony · CCA · RPCA方法
批次效应校正
Harmony
13
聚类分析
FindNeighbors · FindClusters函数 · 分辨率参数调优
聚类分析
FindNeighbor…
14
UMAP可视化
RunUMAP函数 · 降维参数设置 · 聚类结果展示
UMAP
可视化
15
标记物鉴定
FindAllMarkers函数 · 筛选标准 · 热图可视化
标记物鉴定
FindAllMarke…
16
细胞类型注释
手动注释与自动注释 · SingleR集成 · 参考数据库使用
细胞类型注释
手动注释
17
标准化后的差异表达
比较不同标准化方法对差异基因检测的影…
标准化后的差异表…
比较不同标准化方…
18
基因表达可视化
FeaturePlot · VlnPlot · DotPlot
基因表达可视化
FeaturePlot
19
细胞周期得分
CellCycleScoring函数 · 去除细胞周期效应
细胞周期得分
CellCycleSco…
20
代谢通路的标准化
通过AddModuleScore评估…
代谢通路的标准化
AddModuleSco…
21
数据整合
合并多个样本时的标准化策略 · SplitObject与整合
数据整合
合并多个样本时的…
22
参考映射
FindTransferAnchor… · MapQuery函数 · 利用参考数据集标准化
参考映射
FindTransfer…
23
正则化与权重
正则化参数的影响 · 权重调整 · 实际案例
正则化
权重
24
稀疏矩阵处理
Seurat中稀疏矩阵的存储 · 内存优化 · 标准化效率
稀疏矩阵处理
Seurat
25
双细胞检测
DoubletFinder与Scru… · 标准化前/后检测差异
双细胞检测
DoubletFinde…
26
标准化后数据导出
获取标准化矩阵 · 写入CSV/10X格式 · 与下游工具对接
标准化后数据导出
获取标准化矩阵
27
性能调优
多线程并行 · 使用future包加速 · 大数据集建议
性能调优
多线程并行
28
常见错误与调试
报错信息解析 · 数据格式问题 · 版本兼容性
常见错误
调试
29
实战案例一
PBMC数据标准化全流程(从raw到…
实战案例一
PBMC
30
实战案例二
鼠脑数据标准化与细胞类型鉴定(含批次…
实战案例二
鼠脑数据标准化
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