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生物信息学与 AI 制药工程
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029-RNA-seq表达分析批次质控
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《edgeR广义线性模型批次差异分析》
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本课程属于:029-RNA-seq表达分析批次质控
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edgeR广义线性模型批次差异分析
共计 30 章节
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01
edgeR简介
RNA-seq差异表达分析背景 · edgeR核心思想 · 与limma/deSeq2的对比
edgeR
简介
02
环境搭建
R与RStudio安装 · Bioconductor配置 · edgeR包安装与版本管理
环境搭建
RStudio
03
数据准备
输入数据格式(基因表达矩阵 · 分组信息) · 读取counts文件
数据准备
输入数据格式
04
DGEList对象
创建DGEList · 指定分组因子 · 添加基因注释信息
DGEList
对象
05
过滤低表达基因
过滤标准(CPM阈值 · 最小样本数) · 过滤效果评估
过滤低表达基因
CPM
06
标准化
计算标准化因子(TMM · RLE · upperquartile)
标准化
TMM
07
探索性数据分析
MDS图 · PCA图 · 样本间距离热图
探索性数据分析
MDS
08
批次效应识别
可视化批次效应(分组颜色 · 批次颜色) · 使用plotMDS分批次标记
批次效应识别
可视化批次效应
09
设计矩阵
构建公式(~批次+处理) · 创建model.matrix · 检查设计矩阵的秩
设计矩阵
构建公式
10
GLM模型基础
负二项分布 · 均值-方差关系 · dispersion估计(trend…
GLM
模型基础
11
估计离散度
estimateDisp函数 · BCV图 · 离散度分布检查
估计离散度
estimateDisp
12
拟合GLM
glmFit函数 · 系数矩阵理解 · 查看系数名称和对比
GLM
拟合
13
似然比检验
glmLRT函数 · 对比指定(coef或contrast… · 结果提取与排序
似然比检验
glmLRT
14
准似然F检验
glmQLFit+glmQLFTes… · 与LRT的适用场景对比
准似然F检验
glmQLFit+glm…
15
多重检验校正
BH校正 · FDR控制 · p-value分布检验
多重检验校正
BH
16
结果解读
logFC · p-value · FDR
结果解读
logFC
17
火山图绘制
基础火山图(logFC vs -lo… · 标记显著基因 · 自定义阈值线
火山图绘制
logFC
18
MA图绘制
平均表达量 vs logFC · 突出显著基因 · 批次效应残留检查
MA
图绘制
19
热图绘制
显著基因表达热图 · 样本聚类 · 颜色主题与注释条
热图绘制
显著基因表达热图
20
对比矩阵
多组比较时的自定义对比 · constrasts.matrix构… · 多个对比同时检验
对比矩阵
多组比较时的自定…
21
多因子设计
同时含处理 · 批次 · 协变量的模型
多因子设计
同时含处理
22
时间序列分析
连续变量建模 · 多项式时间趋势 · 识别差异表达的时间模式
时间序列分析
连续变量建模
23
批次校正方法
removeBatchEffect函… · 与RUVseq/SVA的配合 · 校正前后效果评估
批次校正方法
removeBatchE…
24
自动化脚本
构建完整分析流程(过滤→标准化→建模… · 参数化运行
自动化脚本
构建完整分析流程
25
实际案例1
单因子两水平(处理vs对照)完整分析 · 含批次已知的校正
实际案例1
vs
26
实际案例2
多因子设计(处理+时间+批次)分析 · 含交互效应检验
实际案例2
多因子设计
27
常见错误与调试
设计矩阵奇异性 · 离散度估计失败 · 对比不匹配
常见错误
调试
28
结果报告
生成可复用的HTML/PDF报告(R… · 包含图与表
结果报告
HTML/PDF
29
性能优化
并行计算(BiocParallel) · 大矩阵处理策略 · 加速dispersion估计
性能优化
BiocParallel
30
总结与进阶
edgeR的局限性 · 与其他工具集成 · 学习资源推荐
进阶
edgeR
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