VIP14

本课程属于：004-CRISPR与基因编辑工程 生物技术_生物工程与智能实验室 · 共 14 门相关课程，组合学习更完整。

查看所属VIP全部课程 →

← 返回所属目录咨询 / 购买

Prime Editing实验工程

共计 30 章节

可可资料掘金营 · 点击在线试看

Prime Editing技术总览与实验工程定位

目标=PE的分子机制 · pegRNA结构 · nCas9-H840A与逆转录酶融合…

目标位点选择与PE可行性预评估

目标=基因组靶点扫描 · PAM可用性分析 · 目标编辑类型分类（替换/插入/缺失）

PE目标位点选择

pegRNA设计与引物延伸序列工程

目标=PBS长度与Tm优化 · RTT长度与模板匹配 · 3'端保护性修饰

nick sgRNA设计与PE系统双sgRNA协同

目标=PE2与PE3策略选择 · 第二条nick sgRNA的位置规则 · 链偏好性

PE表达载体与元件工程

目标=nCas9-H840A-MLV… · 启动子与密码子优化 · 核定位信号

PE2/PE3/PE3b系统选型与实验设计

目标=不同PE版本的结构差异 · 效率与安全性权衡 · PE3b的nick sgRNA匹配策…

PE2/PE3/PE3b系统选型

pegRNA体外转录与纯化工程

目标=T7启动子模板制备 · IVT反应条件优化 · DNase处理

pegRNA体外转录

PE核糖核蛋白复合物组装与递送前质控

目标=Cas9蛋白表达纯化 · RT融合蛋白活性验证 · pegRNA与sgRNA比例优化

PE核糖核蛋白复合物…

PE质粒递送与细胞转染优化

目标=脂质体转染 · 电转条件 · 细胞密度与状态

PE RNP电转与递送工程

目标=RNP电转参数优化 · 脉冲条件 · 缓冲液配方

PE编辑效率的快速检测与定量

目标=Sanger测序与TIDE/I… · NGS文库制备与数据分析 · 编辑效率计算

PE编辑效率的快速检…

PE脱靶分析与安全性评估工程

目标=Cas9依赖脱靶 · RT依赖脱靶 · pegRNA依赖脱靶

PE在点突变修复中的应用工程

目标=致病点突变纠正 · HDR与PE对比 · pegRNA设计要点

PE点突变修复

PE在小片段插入与缺失中的应用工程

目标=精确插入标签或功能序列 · 缺失致病片段 · RTT模板设计

PE小片段插入

PE在基因标签与报告系统构建中的应用

目标=内源蛋白荧光标签敲入 · HiBiT/SNAP标签 · 报告细胞系构建

PE在免疫细胞工程中的应用

目标=T细胞与NK细胞编辑 · TRAC或PDCD1位点改造 · CAR敲入

PE免疫细胞工程

PE在干细胞与类器官中的应用

目标=iPSC与ESC编辑 · 类器官基因修复 · 递送挑战

PE在植物与农业基因组工程中的应用

目标=植物PE载体与递送 · 原生质体与愈伤组织编辑 · pegRNA设计适配

PE在体内递送与动物模型中的应用

目标=AAV拆分PE系统 · LNP-mRNA递送 · 组织特异性启动子

PE实验中的常见问题与故障排除

目标=低效率原因排查 · pegRNA降解 · RT活性不足

PE实验的重复性与标准化工程

目标=实验记录规范 · 对照设置 · 批次效应控制

PE实验的重复性

PE数据分析与生物信息学工程

目标=NGS数据处理流程 · 编辑类型注释 · 脱靶预测算法

PE高通量筛选与文库构建工程

目标=pegRNA文库设计 · 大规模并行编辑 · 条形码策略

PE高通量筛选

PE与其它编辑技术的联合工程

目标=PE与碱基编辑 · PE与CRISPRi/a · PE与重组酶

PE其它编辑技术的联…

PE实验的伦理与法规工程

目标=基因编辑伦理框架 · 临床转化法规 · 知情同意

PE实验的伦理

PE在临床前与临床转化中的工程化

目标=GMP级生产 · 质量控制 · 放行标准

PE实验的成本与资源优化工程

目标=试剂与耗材成本核算 · 高通量策略 · 自动化移液与检测

PE实验的成本

PE实验的自动化与微流控工程

目标=自动化工作站 · 微流控芯片 · 单细胞编辑分析

PE实验的自动化

PE前沿进展与下一代系统工程

目标=PE4/PE5/PE6 · PEmax · epegRNA

PE实验工程综合实战

目标=从靶点选择到pegRNA设计 · 递送 · 检测

PE实验工程综合实战