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原代细胞分离培养与质量控制

共计 30 章节
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01
课程导入与学习地图
目标=原代细胞的定义 · 与细胞系的核心差异 · 分离培养全流程概览
课程导入学习地图
02
原代细胞来源与伦理合规
目标=常见组织来源（人/动物/临床样… · 样本获取途径 · 知情同意
原代细胞来源伦理合规
03
样本采集与运输实战
目标=无菌操作规范 · 采集液与保存液选择 · 冷链运输条件
样本采集运输实战
04
组织预处理与清洗
目标=组织修剪 · 去除坏死与结缔组织 · 清洗液配方
组织预处理清洗
05
机械分离法
目标=剪切 · 研磨 · 筛网过滤
机械分离法目标=剪切
06
酶消化法原理与酶选择
目标=胰蛋白酶 · 胶原酶 · 中性蛋白酶
酶消化法原理酶选择
07
酶消化法操作与优化
目标=消化温度 · 时间 · 浓度
酶消化法操作优化
08
密度梯度离心与细胞富集
目标=Ficoll · Percoll · OptiPrep 等介质原理
密度梯度离心细胞富集
09
免疫磁珠与流式分选
目标=表面标记选择 · 磁珠标记与分选柱操作 · 流式分选设置
免疫磁珠流式分选
10
原代细胞接种与初始培养
目标=接种密度 · 培养基选择 · 血清与添加物
原代细胞接种初始培养
11
原代细胞培养基与添加物
目标=基础培养基类型 · 血清批次筛选 · 无血清/低血清培养
原代细胞培养基添加物
12
培养环境与操作规范
目标=CO2 培养箱参数 · 温度与湿度控制 · 无菌操作
培养环境操作规范
13
原代细胞形态与生长观察
目标=贴壁与悬浮细胞形态 · 汇合度判断 · 生长曲线绘制
原代细胞形态生长观察
14
原代细胞传代与扩增
目标=传代消化液选择 · 传代比例 · 传代次数限制
原代细胞传代扩增
15
原代细胞冻存与复苏
目标=冻存液配方 · 程序降温 · 液氮保存
原代细胞冻存复苏
16
细胞计数与活力检测
目标=血球计数板 · 自动计数仪 · 台盼蓝与荧光活力检测
细胞计数活力检测
17
细胞纯度与鉴定
目标=细胞形态学 · 免疫荧光 · 流式表型
细胞纯度鉴定
18
细胞功能学验证
目标=增殖 · 迁移 · 侵袭
细胞功能学验证目标=增殖
19
微生物污染检测与控制
目标=细菌 · 真菌 · 支原体
微生物污染检测控制
20
内毒素与热原检测
目标=内毒素来源 · 鲎试剂法 · 热原检测
内毒素热原检测
21
细胞交叉污染与身份鉴定
目标=交叉污染案例 · STR分型 · 同工酶图谱
细胞交叉污染身份鉴定
22
原代细胞质量控制体系
目标=QC 指标清单 · 放行标准 · 批次记录
原代细胞质量控制…QC
23
原代细胞培养常见问题排查
目标=贴壁差 · 生长慢 · 死亡多
原代细胞培养常见…目标=贴壁差
24
不同组织来源原代细胞分离实战
目标=肝细胞 · 神经元 · 心肌细胞
不同组织来源原代…目标=肝细胞
25
干细胞与类器官原代培养
目标=间充质干细胞 · 诱导多能干细胞 · 类器官构建
干细胞类器官原代培养
26
3D 培养与微载体培养
目标=3D 支架 · 悬滴法 · 微载体
3D培养
27
原代细胞在药物筛选中的应用
目标=细胞模型选择 · 药效评价 · 毒性测试
原代细胞药物筛选
28
原代细胞在细胞治疗中的应用
目标=临床级细胞制备 · GMP 要求 · 过程控制
原代细胞细胞治疗
29
原代细胞培养数据记录与可追溯性
目标=实验记录规范 · 电子数据管理 · 样本溯源
原代细胞培养数据…可追溯性
30
课程总结与综合实战
目标=全流程复盘 · 质量控制案例讨论 · 综合实验设计
课程总结综合实战