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《多重PCR体系设计与检测工程》
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本课程属于:002-PCR与核酸检测工程
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多重PCR体系设计与检测工程
共计 30 章节
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01
多重PCR体系设计总论
目标=多重PCR的定义 · 技术优势 · 应用场景
PCR
多重
02
靶标序列获取与序列比对
目标=从公共数据库获取靶标序列 · 同源比对 · 保守区与变异区识别
靶标序列获取
序列比对
03
引物设计核心参数
目标=引物长度 · GC含量 · Tm值
引物设计核心参数
目标=引物长度
04
多重PCR引物兼容性设计
目标=引物间交叉二聚体预测 · Tm窗口统一 · 浓度配比原则与兼容性优化策略
PCR
多重
05
探针设计原理与类型选择
目标=TaqMan探针 · 分子信标 · 杂交探针
探针设计原理
类型选择
06
扩增子长度与靶标分区设计
目标=扩增子长度选择 · 多靶标分区策略 · 短扩增子与降解样本适配
扩增子长度
靶标分区设计
07
多重PCR反应体系组成
目标=缓冲液 · dNTPs · Mg2+
PCR
多重
08
热循环条件优化
目标=退火温度梯度 · 延伸时间 · 循环数
热循环条件优化
目标=退火温度梯…
09
多重PCR扩增偏倚与竞争抑制
目标=偏倚来源 · 高丰度靶标抑制 · 引物竞争
PCR
多重
10
引物二聚体与非特异性扩增排查
目标=二聚体形成机制 · 非特异条带识别 · 实验排查与体系重设计
引物二聚体
非特异性扩增排查
11
多重PCR体系灵敏度评估
目标=梯度稀释模板 · 检出限确定 · 置信区间与灵敏度验证方案
PCR
多重
12
多重PCR体系特异性验证
目标=阴性对照 · 交叉反应测试 · 近缘物种/同源基因特异性验证
PCR
多重
13
多重PCR重复性与重现性评价
目标=批内 · 批间 · 操作者间变异评估与统计分析方法
PCR
多重
14
多重PCR检测平台选择
目标=荧光定量PCR仪 · 数字PCR · 毛细管电泳
PCR
多重
15
荧光通道与染料配置
目标=FAM · HEX · ROX
荧光通道
染料配置
16
多重PCR熔解曲线分析
目标=熔解曲线原理 · Tm区分多靶标 · 高分辨率熔解曲线应用与结果判读
PCR
多重
17
多重PCR毛细管电泳检测
目标=片段大小设计 · 内标选择 · 峰图判读
PCR
多重
18
数字PCR多重检测
目标=微滴/微腔室分区 · 多重荧光编码 · 绝对定量与低丰度靶标检测
PCR
数字
19
多重PCR在病原体检测中的应用
目标=呼吸道病原体 · 肠道病原体 · 性传播病原体多重检测体系设计案例
PCR
多重
20
多重PCR在基因分型与突变检测中的应用
目标=SNP分型 · 耐药突变 · 融合基因与肿瘤突变多重检测设计
PCR
多重
21
多重PCR在转基因与物种鉴定中的应用
目标=转基因成分筛查 · 物种源性鉴定 · 肉制品掺假检测体系设计
PCR
多重
22
多重PCR在食品安全与环境监测中的应用
目标=食源性致病菌 · 毒素基因 · 环境DNA与生物监测多重体系
PCR
多重
23
多重PCR在临床诊断中的验证与合规
目标=临床样本类型 · 核酸提取 · 抑制物处理
PCR
多重
24
多重PCR引物探针的合成与质控
目标=合成纯度 · 浓度定量 · 分装保存
PCR
多重
25
多重PCR试剂盒工程化开发
目标=组分优化 · 冻干与液体剂型 · 稳定性加速试验
PCR
多重
26
多重PCR自动化与高通量实现
目标=自动化移液 · 微流控芯片 · 384/1536孔板
PCR
多重
27
多重PCR数据分析与结果判读
目标=扩增曲线分析 · Ct值阈值设定 · 熔解峰识别
PCR
多重
28
多重PCR假阳性与假阴性控制
目标=污染来源 · UNG防污染系统 · 阴性对照设置
PCR
多重
29
多重PCR体系设计实战
目标=从靶标选择到引物探针设计 · 体系优化 · 验证与检测报告撰写的完整项目演练
PCR
多重
30
多重PCR技术前沿与工程展望
目标=CRISPR检测 · 等温扩增联用 · 微流控集成
PCR
多重
所属VIP或分类
同VIP:PCR实验质量控制与故障诊断
同VIP:PCR引物设计与体系优化工程
同VIP:PCR污染控制与假阳性排查