VIP14
本课程属于：001-分子克隆与基因工程 生物技术_生物工程与智能实验室 · 共 14 门相关课程，组合学习更完整。
查看所属VIP全部课程 →
← 返回所属目录 咨询 / 购买

病毒载体构建与实验验证

共计 30 章节
可可资料掘金营 · 点击在线试看
01
病毒载体概述与课程地图
目标=病毒载体的定义 · 分类 · 应用领域
病毒载体概述课程地图
02
病毒载体构建的分子生物学基础
目标=基因元件 · 启动子 · 报告基因
病毒载体构建的分…目标=基因元件
03
常用病毒载体系统比较
目标=慢病毒 · 腺相关病毒 · 腺病毒
常用病毒载体系统…目标=慢病毒
04
慢病毒载体构建实战
目标=从载体图谱解析 · 目的基因克隆 · 包装质粒配比到转染级质粒制备的完整流…
慢病毒载体构建实…目标=从载体图谱…
05
腺相关病毒载体构建实战
目标=AAV基因组结构 · rep/cap基因功能 · ITR完整性要求及重组AAV质粒的组…
腺相关病毒载体构…AAV
06
腺病毒载体构建实战
目标=Ad5型载体骨架 · 同源重组与AdEasy系统 · 目的基因插入与重组腺病毒质粒的鉴定
腺病毒载体构建实…Ad5
07
病毒载体构建中的限制性内切酶与连接技术
目标=酶切位点选择 · 载体去磷酸化 · 连接效率优化及常见问题排查
病毒载体构建限制性内切酶
08
无缝克隆与重组技术在病毒载体构建中的应用
目标=Gibson组装 · In-Fusion · Gateway克隆等方法的操作要点与…
无缝克隆重组技术
09
病毒载体构建中的定点突变与基因编辑
目标=重叠延伸PCR · CRISPR/Cas9辅助突变及突变…
病毒载体构建定点突变
10
病毒载体质粒的转化、扩增与抽提
目标=感受态细胞制备 · 转化条件优化 · 无内毒素质粒大量制备与质量检测
病毒载体质粒的转…扩增
11
病毒载体包装细胞的培养与维护
目标=HEK293T · AAV-293等包装细胞的培养条件 · 传代与转染前状态评估
病毒载体包装细胞…维护
12
慢病毒包装与收获实战
目标=磷酸钙转染与PEI转染方法 · 包装质粒比例优化 · 病毒上清收集与浓缩策略
慢病毒包装收获实战
13
AAV包装与纯化实战
目标=三质粒共转染 · 细胞裂解 · 碘克沙醇密度梯度离心与AAV滴度测定
AAV包装
14
腺病毒包装与扩增实战
目标=线性化腺病毒质粒转染 · 病毒空斑形成 · 扩增与氯化铯梯度纯化
腺病毒包装扩增实战
15
病毒载体滴度测定方法
目标=qPCR法 · 流式细胞术法 · 免疫染色法及不同滴度单位（IU
病毒载体滴度测定…qPCR
16
病毒载体感染实验设计
目标=MOI确定 · 感染时间 · 增强感染效率的试剂（Polybren…
病毒载体感染实验…MOI
17
病毒载体介导的基因过表达验证
目标=Western blot · qRT-PCR · 荧光显微镜观察及表达稳定性评估
病毒载体介导的基…Western
18
病毒载体介导的基因敲低验证
目标=shRNA设计 · 敲低效率检测 · 脱靶效应分析与 rescue 实验设…
病毒载体介导的基…shRNA
19
病毒载体介导的基因编辑验证
目标=CRISPR/Cas9递送 · indel 检测 · T7E1酶切与测序验证
病毒载体介导的基…CRISPR/Cas9
20
病毒载体在体外细胞模型中的功能验证
目标=细胞增殖 · 凋亡 · 迁移
病毒载体体外细胞模型
21
病毒载体在体内动物模型中的验证
目标=注射途径 · 剂量 · 组织特异性表达检测及免疫反应评估
病毒载体体内动物模型
22
病毒载体实验的对照设置与统计分析
目标=阴性对照 · 阳性对照 · 空载体对照及生物学重复与技术重复的设…
病毒载体实验的对…统计分析
23
病毒载体构建与验证中的常见问题与故障排除
目标=低滴度 · 低感染效率 · 细胞毒性
病毒载体构建验证
24
病毒载体的质量控制与安全性评估
目标=复制 competent 病毒… · 内毒素检测 · 无菌检测及生物安全等级要求
病毒载体的质量控…安全性评估
25
病毒载体实验记录与数据管理
目标=实验记录规范 · 原始数据保存 · 图像处理伦理及可重复性要求
病毒载体实验记录数据管理
26
病毒载体构建与验证的自动化与高通量策略
目标=液体处理工作站 · 多孔板转染 · 自动化滴度检测及数据分析
病毒载体构建验证的自动化
27
病毒载体在基因治疗与疫苗开发中的应用案例
目标=已上市产品 · 临床试验设计及载体优化方向
病毒载体基因治疗
28
病毒载体构建与验证的伦理与法规
目标=基因操作伦理 · 生物安全法规 · 临床试验申报及知识产权考量
病毒载体构建验证的伦理
29
病毒载体实验的论文撰写与成果展示
目标=方法部分撰写 · 图表制作 · 结果呈现及审稿常见问题应对
病毒载体实验的论…成果展示
30
课程综合实战
目标=从零构建一个慢病毒载体 · 包装 · 感染目标细胞并完成功能验证的完整项目…
课程综合实战目标=从零构建一…