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生物技术_生物工程与智能实验室
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001-分子克隆与基因工程
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《核酸提取纯化与质量控制工程》
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本课程属于:001-分子克隆与基因工程
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核酸提取纯化与质量控制工程
共计 30 章节
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01
核酸提取纯化工程导论
目标=课程定位 · 核酸提取纯化在分子诊断与生物制造中的… · 全流程质量控制框架与关键性能指标
核酸提取纯化工程…
目标=课程定位
02
样本采集、运输与保存工程
目标=各类临床 · 环境 · 食品与法医样本的采集规范
样本采集
运输
03
样本前处理与均质化
目标=组织 · 细胞 · 血液
样本前处理
均质化
04
细胞裂解工程
目标=化学裂解 · 酶解 · 机械裂解与热裂解的原理
细胞裂解工程
目标=化学裂解
05
核酸释放与稳定
目标=裂解体系中核酸酶抑制 · 核酸保护剂 · pH与离子强度调控
核酸释放
稳定
06
液相萃取与相分离
目标=酚-氯仿萃取 · 盐析 · 聚合物双水相分离等经典方法的原理
液相萃取
相分离
07
固相萃取与硅基质吸附
目标=硅胶膜 · 磁珠 · 玻璃纤维等固相载体表面化学
固相萃取
硅基质吸附
08
磁珠法核酸提取工程
目标=磁珠合成与修饰 · 粒径与磁响应性 · 结合液与洗涤液配方
磁珠法核酸提取工…
目标=磁珠合成
09
离子交换与亲和纯化
目标=阴离子交换 · 亲和标签 · 寡核苷酸捕获等技术在质粒
离子交换
纯化
10
核酸沉淀与浓缩
目标=乙醇沉淀 · 异丙醇沉淀 · PEG沉淀
核酸沉淀
浓缩
11
DNA提取专项工程
目标=基因组DNA · 质粒DNA · 游离DNA与古DNA的提取策略
DNA
提取专项工程
12
RNA提取专项工程
目标=总RNA · mRNA · miRNA与病毒RNA提取的RNas…
RNA
提取专项工程
13
病毒核酸提取工程
目标=灭活 · 裂解 · 核酸释放与纯化集成
病毒核酸提取工程
目标=灭活
14
细菌与真菌核酸提取
目标=革兰氏阳性/阴性菌 · 分枝杆菌 · 酵母与丝状真菌的破壁难点
细菌
真菌核酸提取
15
植物与食品核酸提取
目标=多糖多酚去除 · CTAB法改进 · 转基因成分检测与食源性病原体核酸提取…
植物
食品核酸提取
16
环境与法医样本核酸提取
目标=土壤 · 水体 · 气溶胶与微量接触样本的富集
环境
法医样本核酸提取
17
提取纯化试剂与耗材工程
目标=裂解液 · 结合液 · 洗涤液
提取纯化试剂
耗材工程
18
自动化提取设备与平台
目标=移液机器人 · 磁棒工作站 · 微流控芯片与全自动核酸提取仪的工艺适…
自动化提取设备
平台
19
高通量提取与流水线集成
目标=96/384孔板提取 · 样本追踪 · 条码管理
高通量提取
流水线集成
20
核酸提取纯度评价
目标=A260/A280 · A260/A230 · 荧光染料法
核酸提取纯度评价
A260/A280
21
核酸浓度定量与标准曲线
目标=紫外分光光度法 · 荧光定量法 · 数字PCR与qPCR定量
核酸浓度定量
标准曲线
22
抑制剂与污染物控制
目标=常见PCR/NGS抑制剂来源 · 去除策略 · 抑制试验设计
抑制剂
污染物控制
23
核酸提取回收率与重复性验证
目标=回收率测定 · 批内/批间精密度 · 线性范围
核酸提取回收率
重复性验证
24
交叉污染与气溶胶控制工程
目标=单向工作流 · 分区管理 · 防污染试剂
交叉污染
气溶胶控制工程
25
核酸提取质量控制体系
目标=ISO 15189 · ISO 13485 · GMP与IVD法规要求
核酸提取质量控制…
ISO
26
提取试剂盒性能验证
目标=灵敏度 · 特异性 · 精密度
提取试剂盒性能验…
目标=灵敏度
27
核酸参考物质与能力验证
目标=标准物质制备 · 定值方法 · 均匀性与稳定性检验
核酸参考物质
能力验证
28
提取纯化过程故障排查
目标=低产量 · 低纯度 · 降解
提取纯化过程故障…
目标=低产量
29
核酸提取纯化在分子诊断中的应用
目标=qPCR · 数字PCR · 等温扩增
核酸提取纯化
分子诊断
30
核酸提取纯化工程前沿与综合实战
目标=微流控 · 单细胞提取 · cfDNA富集
核酸提取纯化工程…
综合实战
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