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003-单细胞与空间组学分析工程
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《Visium空间转录组全流程分析》
VIP13
本课程属于:003-单细胞与空间组学分析工程
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Visium实战案例:从原始数据到聚类
共计 30 章节
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01
Visium技术简介
空间转录组学背景 · 10x Visium平台原理 · 实验流程概述
Visium
技术简介
02
数据获取
从10x官网下载示例数据集(小鼠大脑… · 理解spatial · filtered_feature_b…
数据获取
从10x官网下载…
03
环境配置
安装Scanpy · Squidpy · matplotlib
环境配置
Scanpy
04
数据读取
使用Scanpy读取Visium数据 · 理解AnnData对象结构(obs · var
数据读取
Scanpy
05
空间坐标与图像
加载组织切片图像 · spot坐标 · 使用Squidpy可视化组织切片上的…
空间坐标
图像
06
质量控制(QC)
计算每个spot的基因数 · UMI数 · 线粒体基因比例
QC
质量控制
07
过滤与标准化
基于QC指标过滤spot · 对UMI计数进行对数标准化(log1…
过滤
标准化
08
高变基因选择
识别高变基因(HVGs) · 用于后续降维和聚类
高变基因选择
HVGs
09
主成分分析(PCA)
对高变基因进行PCA降维 · 解释主成分方差贡献 · 选择合适的主成分数
PCA
主成分分析
10
邻居图构建
计算spot间的邻近关系(基于PCA… · 构建KNN图 · 设定n_neighbors参数
邻居图构建
spot
11
UMAP与t-SNE
利用UMAP/t-SNE对数据进行非… · 可视化全局结构
UMAP
t-SNE
12
聚类算法介绍
Louvain · Leiden等社区发现算法原理 · 参数resolution的影响
聚类算法介绍
Louvain
13
聚类实战
使用Scanpy的leiden()函… · 设置不同resolution观察聚类…
聚类实战
Scanpy
14
聚类结果可视化
在UMAP嵌入和空间坐标上绘制聚类结… · 使用不同颜色标识cluster
聚类结果可视化
UMAP
15
标记基因鉴定
使用Scanpy的rank_gene…
标记基因鉴定
Scanpy
16
标记基因可视化
热图 · 点图 · 小提琴图展示标记基因在不同clust…
标记基因可视化
热图
17
空间表达模式
绘制特定基因在组织切片上的表达空间分…
空间表达模式
绘制特定基因
18
区域注释
根据标记基因和已知解剖学知识对clu… · 海马体等)
区域注释
clu
19
差异表达分析
比较不同区域或条件间的差异表达基因(…
差异表达分析
比较不同区域或条…
20
空间自相关
使用Moran‘s I统计量评估基因…
空间自相关
Moran
21
空间变量基因
利用Squidpy的sepal识别空…
空间变量基因
Squidpy
22
空间轨迹分析
沿着组织结构(如皮层层次)分析基因表…
空间轨迹分析
沿着组织结构
23
多切片对齐
将多个Visium切片数据进行整合(…
多切片对齐
Visium
24
细胞类型去卷积
使用CARD或SPOTlight从空…
细胞类型去卷积
CARD
25
配体-受体分析
利用CellChat或NicheNe…
配体
受体分析
26
邻域富集分析
计算不同cluster之间的空间共定…
邻域富集分析
cluster
27
图像处理与组织分割
利用H&E染色图像进行组织分割 · 辅助注释
图像处理
组织分割
28
结果导出
将聚类结果 · 标记基因表格导出为CSV/TSV · 生成可交互的HTML报告
结果导出
将聚类结果
29
实战案例总结
回顾完整分析流程 · 常见错误及调试方法 · 性能优化技巧
实战案例总结
回顾完整分析流程
30
扩展与展望
Visium HD · Xenium等新技术对比 · 空间多组学融合趋势
扩展
Visium
所属VIP或分类
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