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生物技术_生物工程与智能实验室
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011-抗体工程与免疫分析技术
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《单克隆抗体制备与筛选工程》
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本课程属于:011-抗体工程与免疫分析技术
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单克隆抗体制备与筛选工程
共计 30 章节
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01
单克隆抗体工程导论
目标=单克隆抗体的定义 · 发展历程 · 与多克隆抗体的本质区别
单克隆抗体工程导…
目标=单克隆抗体…
02
抗原设计与免疫原性分析
目标=抗原表位预测 · 半抗原偶联载体蛋白策略 · 抗原纯度与佐剂选择
抗原设计
免疫原性分析
03
免疫方案与动物免疫操作
目标=小鼠 · 大鼠 · 兔等免疫动物的选择依据
免疫方案
动物免疫操作
04
骨髓瘤细胞系与融合伴侣选择
目标=常用骨髓瘤细胞系(如SP2/0 · NS0 · P3X63Ag8.653)的特性
骨髓瘤细胞系
融合伴侣选择
05
细胞融合技术原理与操作
目标=PEG诱导融合 · 电融合和病毒介导融合的机制比较 · 融合参数优化
细胞融合技术原理
操作
06
杂交瘤细胞选择性培养与HAT筛选
目标=HAT培养基筛选原理 · 叶酸代谢途径与核苷酸补救合成机制 · 氨基蝶呤作用机理及未融合细胞死亡过程…
HAT
杂交瘤细胞选择性…
07
有限稀释克隆化与单克隆保证
目标=有限稀释法的统计学原理 · 克隆化操作步骤 · 单克隆孔判定标准
有限稀释克隆化
单克隆保证
08
杂交瘤细胞培养与扩大生产
目标=低血清与无血清驯化策略 · 悬浮培养与贴壁培养对比 · 生物反应器放大
杂交瘤细胞培养
扩大生产
09
单克隆抗体筛选策略总论
目标=筛选目标设定 · 阳性克隆识别标准 · 结合活性与功能活性筛选的层级设计
单克隆抗体筛选策…
目标=筛选目标设…
10
基于ELISA的抗体结合筛选
目标=间接ELISA · 夹心ELISA · 竞争ELISA在杂交瘤上清筛选中的应…
ELISA
基于
11
抗体亚型鉴定与特性分析
目标=小鼠Ig类与亚类(IgG1 · IgG2a · IgG2b
抗体亚型鉴定
特性分析
12
抗体亲和力测定与成熟度评估
目标=表面等离子共振(SPR) · 生物膜干涉(BLI) · 等温滴定量热(ITC)和ELISA亲…
抗体亲
力测定
13
抗体特异性与交叉反应性评价
目标=交叉反应谱分析 · 组织交叉反应 · 同源蛋白与异构体鉴别
抗体特异性
交叉反应性评价
14
功能筛选与中和活性评价
目标=中和抗体筛选模型 · 病毒中和试验 · 细胞增殖抑制
功能筛选
活性评价
15
抗体基因克隆与序列分析
目标=杂交瘤细胞mRNA提取 · 可变区基因扩增 · 引物设计策略
抗体基因克隆
序列分析
16
重组抗体表达载体构建
目标=鼠源抗体人源化改造基础 · 嵌合抗体构建 · 表达载体元件选择
重组抗体表达载体…
目标=鼠源抗体人…
17
抗体纯化工艺与质量控制
目标=Protein A/G亲和层析 · 离子交换 · 疏水层析
抗体纯化工艺
质量控制
18
抗体稳定性和制剂初步研究
目标=热稳定性 · 冻融稳定性 · pH稳定性评估
抗体稳定性
制剂初步研究
19
杂交瘤细胞株稳定性与保存
目标=连续传代对染色体和抗体分泌的影… · 克隆稳定性监测 · 细胞库建立
杂交瘤细胞株稳定…
保存
20
抗体人源化与亲和力成熟
目标=CDR移植 · 框架回复突变 · 噬菌体展示与酵母展示在亲和力成熟中的…
抗体人源化
力成熟
21
单克隆抗体在诊断中的应用开发
目标=免疫组化 · 免疫荧光 · 流式细胞术
单克隆抗体
诊断
22
单克隆抗体在治疗中的应用开发
目标=治疗性抗体作用机制 · ADCC · CDC
单克隆抗体
治疗
23
抗体工程改造与新型抗体形式
目标=Fab · scFv · 纳米抗体
抗体工程改造
新型抗体形式
24
高通量筛选与自动化技术
目标=自动化液体处理 · 微流控 · 单细胞分选
高通量筛选
自动化技术
25
单B细胞抗体发现技术
目标=单B细胞分选 · RT-PCR扩增抗体基因 · 直接克隆表达
单B细胞抗体发现…
目标=单B细胞分…
26
噬菌体展示抗体库筛选
目标=抗体库构建 · 淘选策略 · 亲和力与特异性筛选
噬菌体展示抗体库…
目标=抗体库构建
27
转基因动物与抗体人源化小鼠
目标=人源化抗体小鼠品系 · 免疫应答特点 · 直接产生全人源单克隆抗体的流程及与传…
转基因动物
抗体人源化小鼠
28
单克隆抗体表征与质控体系
目标=肽图分析 · 糖基化分析 · 电荷变异体
单克隆抗体表征
质控体系
29
单克隆抗体制备与筛选的法规与伦理
目标=实验动物伦理 · 生物安全 · GMP要求
单克隆抗体制备
筛选的法规
30
综合实战项目
目标=从抗原设计到候选单抗筛选的完整… · 实验记录 · 数据分析
综合实战项目
目标=从抗原设计…
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