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细胞系适应性驯化与放大

共计 30 章节
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01
课程导入与全景认知
目标=细胞系适应性驯化的定义 · 放大目标 · 工业应用场景
课程导入全景认知
02
细胞系选择与驯化前评估
目标=常用宿主细胞系（CHO · HEK293 · BHK
细胞系选择驯化前评估
03
细胞培养基础与代谢网络
目标=贴壁与悬浮培养 · 批式/补料/灌流模式 · 葡萄糖
细胞培养基础代谢网络
04
适应性驯化的生物学原理
目标=细胞可塑性 · 表型漂移 · 基因表达重编程
适应性驯化的生物…目标=细胞可塑性
05
驯化实验设计基础
目标=如何设定驯化目标（耐剪切 · 耐高渗 · 耐低温
驯化实验设计基础目标=如何设定驯…
06
无血清与化学成分明确培养基适应
目标=从含血清到无血清/化学限定培养… · 适应期监测指标 · 常见问题（聚集
无血清化学成分明确培养…
07
悬浮化驯化
目标=贴壁细胞向悬浮细胞转变的诱导方… · 载体选择 · 剪切力适应
悬浮化驯化目标=贴壁细胞向…
08
耐剪切与搅拌适应
目标=生物反应器内剪切力来源 · 细胞损伤机制 · 驯化中搅拌转速与通气策略的阶梯式调整
耐剪切搅拌适应
09
耐高渗与渗透压适应
目标=高渗胁迫对细胞的影响 · 渗透压保护剂添加 · 逐步提高渗透压的驯化方案
耐高渗渗透压适应
10
低温与高密度适应
目标=低温驯化提高蛋白表达或延长培养… · 降温策略 · 细胞周期调控
低温高密度适应
11
代谢副产物耐受驯化
目标=乳酸 · 氨 · 二氧化碳等抑制物耐受细胞的驯化方法
代谢副产物耐受驯…目标=乳酸
12
驯化过程中的监测与分析
目标=细胞计数 · 活力 · 凋亡
驯化过程监测
13
驯化细胞库的建立与稳定性
目标=从驯化群体到单克隆的筛选 · 主细胞库和工作细胞库的建立 · 传代稳定性与遗传稳定性评估
驯化细胞库的建立稳定性
14
组学技术在驯化中的应用
目标=转录组 · 蛋白质组 · 代谢组分析在解析驯化机制
组学技术驯化
15
基因编辑辅助驯化
目标=CRISPR/Cas9 · RNA干扰等技术在加速适应性驯化中的… · 靶向改造抗凋亡
基因编辑辅助驯化CRISPR/Cas9
16
小规模筛选模型与高通量驯化
目标=微型生物反应器 · 深孔板 · 摇管等小规模模型在驯化早期筛选中的应…
小规模筛选模型高通量驯化
17
实验室规模生物反应器放大原理
目标=几何相似 · 动力相似 · 传质与混合
实验室规模生物反…目标=几何相似
18
从摇瓶到台式反应器的放大
目标=摇瓶与搅拌反应器的差异 · 接种密度 · pH与DO控制
从摇瓶到台式反应…目标=摇瓶
19
中试规模放大与工艺确认
目标=中试反应器的选型与操作 · 工艺参数确认 · 批次间一致性
试规模放大工艺确认
20
生产规模放大与工程考量
目标=大规模反应器的混合 · 传质 · 热传递
生产规模放大工程考量
21
补料策略与放大
目标=补料培养基设计 · 补料速率与模式（脉冲 · 连续
补料策略放大
22
灌流培养与放大
目标=灌流培养原理 · 细胞截留装置（ATF · TFF）
灌流培养放大
23
过程分析技术与在线控制
目标=在线活细胞密度 · 代谢物 · 产物浓度监测
过程分析技术线控制
24
放大过程中的产物质量一致性
目标=糖基化 · 电荷变异 · 聚集体
放大过程产物质量一致性
25
驯化与放大中的细胞代谢工程
目标=通过代谢通路改造提高底物利用效… · 减少副产物 · 增强产物表达
驯化放大
26
连续制造与强化工艺
目标=连续生物工艺中的细胞系适应性要… · 灌流与连续层析的整合 · 工艺强化案例
连续制造强化工艺
27
案例研究一
目标=CHO细胞无血清悬浮驯化与放大 · 小试到中试放大 · 产物质量对比与问题解决
案例研究一CHO
28
案例研究二
目标=耐高渗细胞系在补料批培养中的放… · 补料工艺开发 · 从2L到200L放大中的混合与传质问…
案例研究二目标=耐高渗细胞…
29
案例研究三
目标=灌流培养中高密度细胞系的驯化与… · 灌流工艺建立 · 从实验室到中试的放大挑战
案例研究三目标=灌流培养
30
课程总结与前沿展望
目标=驯化与放大核心技术回顾 · 未来趋势（自动化 · AI辅助
课程总结前沿展望