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单分子成像基础快速上手

共计 30 章节
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01
课程导入
单分子成像的定义 · 发展历史 · 核心价值
课程导入单分子成像的定义
02
光学基础
衍射极限 · 点扩散函数 · 数值孔径
光学基础衍射极限
03
荧光标记策略
有机染料 · 量子点 · 荧光蛋白的选择原则
荧光标记策略有机染料
04
显微镜系统组成
倒置显微镜 · 物镜 · 滤光片组
显微镜系统组成倒置显微镜
05
全内反射荧光显微镜（TIRF）
TIRF原理 · 穿透深度 · 搭建要点
TIRF全内反射荧光显微…
06
共聚焦与超分辨基础
共聚焦原理 · STED · STORM/PALM
共聚焦超分辨基础
07
单分子定位技术
质心定位 · 高斯拟合 · 定位精度影响因素（光子数
单分子定位技术质心定位
08
单分子追踪（SPT）
粒子检测 · 轨迹连接算法（最近邻 · 卡尔曼滤波）
SPT单分子追踪
09
数据采集流程
样品制备 · 成像缓冲液 · 激发功率
数据采集流程样品制备
10
图像预处理
背景扣除 · 漂移校正 · 降噪滤波（高斯
图像预处理背景扣除
11
单分子检测算法
阈值分割 · 小波变换 · 机器学习检测方法的原理与实战
单分子检测算法阈值分割
12
定位精度与分辨率
Cramér-Rao下界 · 定位不确定度 · 有效分辨率评估
定位精度分辨率
13
单分子荧光寿命成像
荧光寿命原理 · TCSPC测量 · 寿命数据分析与成像
单分子荧光寿命成…荧光寿命原理
14
单分子FRET（smFRET）
FRET原理 · 供体-受体对选择 · 数据采集与效率计算
FRETsmFRET
15
单分子偏振成像
荧光偏振各向异性 · 取向测量 · 在分子动态研究中的应用
单分子偏振成像荧光偏振各向异性
16
单分子力谱与成像结合
光镊 · 磁镊 · AFM与荧光成像联用技术
单分子力谱成像结合
17
活细胞单分子成像
活细胞标记策略 · 光毒性控制 · 快速成像与追踪
活细胞单分子成像活细胞标记策略
18
单分子成像数据分析软件
ImageJ/Fiji · ThunderSTORM · TrackMate
单分子成像数据分…ImageJ/Fiji
19
案例实战一
体外单分子酶动力学——固定化酶 · TIRF成像 · 活性位点追踪
案例实战一体外单分子酶动力…
20
案例实战二
单分子DNA修复蛋白搜索——smFR…
案例实战二DNA
21
案例实战三
细胞膜受体单分子追踪——量子点标记 · 轨迹分类与聚类分析
案例实战三细胞膜受体单分子…
22
案例实战四
超分辨STORM成像——光开关染料 · 缓冲液 · 重建算法与伪影控制
案例实战四STORM
23
常见问题与故障排除
信号弱 · 漂移大 · 闪烁
常见问题故障排除
24
实验设计要点
对照实验 · 重复性 · 统计功效
实验设计要点对照实验
25
数据统计与可视化
轨迹统计分析 · 分布拟合 · 相关函数
数据统计可视化
26
单分子成像前沿进展
MINFLUX · DNA-PAINT · 单分子原位测序等新技术简介
单分子成像前沿进…MINFLUX
27
综合项目一
从样品制备到单分子定位——完成一次完…
综合项目一从样品制备到单分…
28
综合项目二
单分子动态数据分析——模拟数据生成 · 追踪 · 扩散模式分类
综合项目二单分子动态数据分…
29
课程总结与知识体系梳理
核心概念 · 方法流程 · 常见陷阱
课程总结知识体系梳理
30
结业考核与实战挑战
综合设计一个单分子成像实验方案 · 并完成数据分析报告
结业考核实战挑战